HEMOLISIS DARAH
BLOK 6 IMMUNOHEMATOONKOLOGI
A. TUJUAN
1. Untuk
mengetahui pemeriksaan resistensi osmotik darah secara visual.
2. Untuk
mengetahui osmotik yang mulai lisis dan yang lisis sempurna.
B.
Waktu Dan Tempat Praktikum
Waktu : Selasa , 14 Juni
2016
Pukul : 08.00 – 10.00 WIB
Tempat :
Laboratorium Biokimia FK UMSU
C.
Alat dan Bahan
1.
14 Tabung mikrosentrifuge
2.
Reagen EDTA;
3.
Spuit 3cc;
4.
Larutan NaCl
0.5 %
5.
Larutan NaCl
0.9%
6.
Sentrifuge 3000 rpm;
7.
Pipet Tetes;
8.
Torniket;
9.
Kertas Label;
10.
Rak tabung;
11.
Vortex;
12.
Handscoon;
13.
Kapas alkohol;
14.
Serum 1cc;
15.
Aquadest;
16.
Tissue;
D. CARA KERJA
-
Pengambilan
Darah
1. menyiapkan
peralatan dengan membuka kemasan spuit, alcohol swab dan tourniquet
2. mencuci tangan 7 langkah
3. menggunakan handscoon
4. memasangkan tourniquet ke lengan pasien (
teman kelompok ) serta meminta orang tersebut menggenggam tangannya
5. meraba vena mediana cubiti
6. setelah vena ditemukan, bersihkan daerah vena
dengan menggunakan alcohol swab secara sentripetal
7. menusukkan jarum kedalam vena dengan bevel
menghadapt keatas
8. mengaspirasi perlahan hingga mendapat darah,
( jika darah tidak ada lakukan penusukan ditempat yang baru dengan mengulang
langkah 4 sampai 8 )
9. jika telah dapat darah maka lepaskan
tourniquet dan lepaskan juga genggaman tanggan pasien
10. mengambil darah kira-kira sebanyak 2 ml
11. menyuruh
pasien untuk melipat tangaannya agar darah tidak keluar kembali
12. memasukkan darah tersebut ke dalam tabung
yang telah berisi EDTA
13.
menggoyangkan tabung yang berisi darah dan EDTA tadi agat tercampur dengan
merata.
-
Cara Kerja Pemeriksaan Hemolisis
Osmotik dengan mesin Microcentrifuge
1.
Menyusun
14 tabung reaksi pada rak tabung reaksi
2.
Masing-masing
tabung tersebut diberi nomor dari kiri ke kanan dengan urutan :
25,24,23,22,21,20,19,18,17,16,15,14, tabung control (+) dan tabung control
negative (-).
3.
mengisi
tabung microcentrifuge seperti berikut :
Tabung
|
NaCl 0,5%
|
Aquades
|
Konsentrasi
|
Darah pada tabung perlakuan
|
||
25
|
25
|
0
|
0,5%
|
1 Tetes
|
||
24
|
24
|
1
|
0,48%
|
1 Tetes
|
||
23
|
23
|
2
|
0,46%
|
1 Tetes
|
||
22
|
22
|
3
|
0,44%
|
1 Tetes
|
||
21
|
21
|
4
|
0,42%
|
1 Tetes
|
||
20
|
20
|
5
|
0,40%
|
1 Tetes
|
||
19
|
19
|
6
|
0,38%
|
1 Tetes
|
||
18
|
18
|
7
|
0,36%
|
1 Tetes
|
||
17
|
17
|
8
|
0,34%
|
1 Tetes
|
||
16
|
16
|
9
|
0,32%
|
1 Tetes
|
||
15
|
15
|
10
|
0,30%
|
1 Tetes
|
||
14
|
14
|
11
|
0,28%
|
1 Tetes
|
||
Kontrol (+)
|
Aquadest 15
Tetes
|
Darah 5 Tetes
|
Kontrol (-)
|
NaCl 0,9%
|
Darah 5 Tetes
|
4. Memvortex
14 tabung
5. Mendokumentasikan
14 tabung
6. Mencentrifuge
14 tabung selama 5 menit dalam 3000 rpm
7. Mendokumentasikan
kembali 14 tabung
8. Mengamati
hasil pengamatan.
9. Membaca
tabung dimana terjadi permulaan hemolisis dan tabung dimana terjadi hemolisis
yang sempurna.
-
Cara Kerja Pemeriksaan Hemolisis
Osmotik tanpa mesin Microcentrifuge
1.
Menyusun
14 tabung reaksi pada rak tabung reaksi
2. Masing-masing
tabung tersebut diberi nomor dari kiri ke kanan dengan urutan :
25,24,23,22,21,20,19,18,17,16,15,14, tabung control (+) dan tabung control
negative (-).
3.
mengisi
tabung microcentrifuge seperti berikut :
Tabung
|
NaCl 0,5%
|
Aquades
|
Konsentrasi
|
Darah pada tabung perlakuan
|
||
25
|
25
|
0
|
0,5%
|
1 Tetes
|
||
24
|
24
|
1
|
0,48%
|
1 Tetes
|
||
23
|
23
|
2
|
0,46%
|
1 Tetes
|
||
22
|
22
|
3
|
0,44%
|
1 Tetes
|
||
21
|
21
|
4
|
0,42%
|
1 Tetes
|
||
20
|
20
|
5
|
0,40%
|
1 Tetes
|
||
19
|
19
|
6
|
0,38%
|
1 Tetes
|
||
18
|
18
|
7
|
0,36%
|
1 Tetes
|
||
17
|
17
|
8
|
0,34%
|
1 Tetes
|
||
16
|
16
|
9
|
0,32%
|
1 Tetes
|
||
15
|
15
|
10
|
0,30%
|
1 Tetes
|
||
14
|
14
|
11
|
0,28%
|
1 Tetes
|
||
Kontrol (+)
|
Aquadest 15
Tetes
|
Darah 5 Tetes
|
Kontrol (-)
|
NaCl 0,9%
|
Darah 5 Tetes
|
4. Memvortex
14 tabung
5. Mendokumentasikan
14 tabung
6. Mendiamkannya
selama 30 menit lalu Mendokumentasikannya kembali 14 tabung
7. Mendiamkannya
lagi selama 30 menit kedua
8. Mendokumentasikannya
kembali 14 tabung
9. Mengamaati
hasil pengamatan
10. Membaca
tabung dimana terjadi permulaan hemolisis dan tabung dimana terjadi hemolisis
yang sempurna.
E.
HASIL
PENGAMATAN
-
HASIL PENGAMATAN
TANPA DISENTRIFUGASI
Hasil
kelompok 3
No.
Tabung
|
30 Menit
Pertama
|
Setelah 2
Jam
|
Kesimpulan
|
25
|
(+)endapan*,
(+)lapisan*
|
(+) endapan, warna terang
|
Tidak hemolisis
|
24
|
(+)endapan**,(+)
lapisan*
|
(+) endapan, kekuningan
|
Hemolisis sebagian
|
23
|
(+)endapan***,(+)
lapisan**
|
(+)endapan,kekuningan
|
Hemolisis sebagian
|
22
|
(+)endapan****,(+)
lapisan**
|
(+)endapan,kekuningan
|
Hemolisis sebagian
|
21
|
Endapan*, lapisan*
|
(+) endapan, warna bening
|
Tidak lisis
|
20
|
Endapan**** ,lapisan**
|
(+) endapan, kekuningan
|
Hemolisis sebagian
|
19
|
Endapan*, lapisan*
|
(-)endapan,warna merah
|
Hemolisis sempurna
|
18
|
Endapan*, lapisan*
|
(-)endapan,warna merah
|
Hemolisisis ( C)
|
17
|
Endapan****, lapisan*
|
(-)endapan,warna merah
|
Hemolisisis ( C)
|
16
|
(-)endapan
,lapisan*
|
(-)endapan,warna merah
|
Hemolisisis ( C)
|
15
|
(-)endapan,
lapisan*
|
(-)endapan,warna merah
|
Hemolisisis ( C)
|
14
|
(-)endapan,
lapisan*
|
(-)endapan,warna merah
|
Hemolisisis ( C)
|
(+)
|
(-)endapan,(-)
lapisan
|
(-)endapan,warna merah
|
Hemolisisis ( C)
|
(-)
|
Endapan**** ,(-)lapisan
|
(+) endapan
|
Hemolisis sebagian
|
NOTE :
semakin banyak jumlah (*), semakin pekat endapan atau semakin tebal lapisan.
© =
Complete Hemolisis
Kesimpulan
:
1.
Lisis sempurna pada tabung control positif
karena dicampurkan dengan larutan
aquades yang akan menyebabkan hipotonis, tidak terdapat endapan
2.
Mulai Lisis
pada tabung control negative 20 dan 21.
Terdapat endapan sel darah merah didalam tabung dan berwarna kekuningan.
3.
Tidak lisis
pada tabung 25 dan 21 . Terdapat endapan
dan berwarna bening.
-
HASIL
PENGAMATAN DENGAN DISENTRIFUGASI
-
Hasil
kelompok 1
No.
Tabung
|
Sebelum
disentrifugasi
|
Setelah
disentrifugasi
|
Setelah
disentrifugasi
|
25
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kekuningan
|
Tidak Lisis
|
24
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kekuningan
|
Tidak Lisis
|
23
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kekuningan
|
Tidak Lisis
|
22
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kekuningan
|
Tidak Lisis
|
21
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kekuningan
|
Tidak Lisis
|
20
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kekuningan
|
Tidak Lisis
|
19
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kemerahan
|
Mulai Lisis
|
18
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kemerahan
|
Mulai Lisis
|
17
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kekuningan
|
Lisis
|
16
|
Warna Merah
|
(+) endapan, warna kekuningan
|
Lisis
|
15
|
- (kekurangan darah)
|
-
|
-
|
14
|
- (kekurangan darah)
|
-
|
-
|
(+)
|
Warna Merah
|
(-) endapan, warna merah
|
Lisis Sempurna
|
(-)
|
Warna Merah
|
(+)endapan, warna merah( tercampur aquades dan percobaan
gagal )
|
Lisis Sebagian
|
Kesimpulan
:
1.
Lisis
sempurna pada tabung control positif karena dicampurkan dengan larutan aquades yang akan menyebabkan
hipotonis, tidak terdapat endapan
2.
Lisis
sebagian pada tabung17 dan 16. Terdapat endapan sel darah merah didalam tabung
dan berwarna kekuningan.
3.
Mulai Lisis
pada tabung 19 dan 18. Terdapat endapan
sel darah merah didalam tabung dan berwarna kekuningan.
4.
Tidak lisis
pada tabung 25 sampai 18 . Terdapat
endapan dan berwarna bening.
5.
Pada tabung
control negative seharusnya tidak lisis dan terdapat endapan sel darah merah
serta cairan diatasnya berwarna bening, namun pada saat percobaan kami
melakukan kesalahan dengan memasukkan aquadest kedalam tabung control negative
sehingga percobaannya tersebut menghasilkan endapan dan cairan berwarna merah
yang artinya percobaan pada tabung control negative gagal. Karena penambahan
aquadest tersebut volume dari tabung juga bertambah.
REFERENSI :
https://www.academia.edu/5009138/HEMOLISA_DAN_KRENASI_GOLONGAN_DARAH_DAN_TEKANAN_DARAH
0 komentar:
Posting Komentar